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大鼠生长调节致癌基因β(GROβ)elisa试剂盒

产品名称: 大鼠生长调节致癌基因β(GROβ)elisa试剂盒
产品型号:
产品特点: 南京信帆生物供应大鼠生长调节致癌基因β(GROβ)elisa试剂盒 ,提供技术指导和售后服务,质量稳定,提供免费代测服务。信帆生物销售的试剂盒均采用进口材料生产,具有操作简单,灵敏度高等特点,咨询

大鼠生长调节致癌基因β(GROβ)elisa试剂盒 的详细介绍
产品名称:大鼠生长调节致癌基因β(GROβ)elisa试剂盒  
英文名称:Rat GROβ (Growth Regulated Oncogene Beta) elisa Kit
规格:48T/96T
产品保质期:6个月
保存条件:2-8度
该试剂盒操作原理:
本试剂盒含量是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系
我们在做ELISA实验的时候,通常选取血液样本为我们的代测样本,具体收集方法如下:
血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
大鼠生长调节致癌基因β(GROβ)elisa试剂盒  
我们在选择抗凝剂的时候,有几点需要注意的:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
组织样本也是我们经常使用到的,动物组织样本的前处理,匀浆方法如下:
动物组织样本的前处理:
1、取组织块(0.1g~0.2g)在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,准确称重,放入匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐使用0.86%的生理盐水)于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式有多种:手工匀浆,机器匀浆,超声粉碎。
①、手工匀浆:将玻璃匀浆管置于冰水浴条件下,手动匀浆,30秒/次,间隔30秒,重复6~8次,制成10%的匀浆液。
②、机器匀浆:用机械式匀浆机(组织捣碎机或内切式匀浆机),8000~10000转/分,冰水浴条件下,10秒/次,间隙30秒,连续3~5次。(皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间)
③、超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用400安培,5秒/次,间隙10秒反复3~5次。
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片,显微镜下观察细胞是否破碎,若没有则可延长匀浆时间。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10~15分钟,取上清液进行测定.(测定相应指标的同时需测一下相应样本的蛋白浓度,总蛋白测试盒本所有售)
大鼠生长调节致癌基因β(GROβ)elisa试剂盒  
我们销售的试剂盒的具体操作简单的特点,具体步骤如下(试剂盒已经包含了所有试剂,自备仪器为酶标仪,洗板机,温育箱,移液器):
1. 加样:标准品设定5个浓度点10个孔,每个浓度设定平行孔,加入50微升不同浓度的标准品,空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔,在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
5. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
6. 温育:操作同3。
7. 洗涤:操作同5。
8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
10. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
大鼠生长调节致癌基因β(GROβ)elisa试剂盒  
我们销售的试剂盒性能稳定:
试剂盒性能我们是通过几个数值反应的:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批间分别小于9%和11%
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